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細胞培養板:如何判斷細胞是否貼壁成功?
使用低吸附細胞培養板時,細胞貼壁成功的判斷標準與常規培養板不同,需結合以下方法綜合評估:
1. 顯微鏡觀察法
貼壁狀態?:低吸附培養板設計為抑制細胞貼壁,若細胞仍能貼壁,說明表面處理可能失效或細胞類型特殊。正常情況應為細胞懸浮生長?。
形態特征?:活細胞應透亮有光澤,死細胞暗淡無光且膜碎裂?。
2. 臺盼藍染色法
原理?:活細胞膜完整,排斥臺盼藍(無色);死細胞膜通透性增加,被染成藍色?。
操作?:染色后3分鐘內觀察,超時可能導致活細胞誤染。
3. 培養液狀態
清澈度?:培養液應清澈,無渾濁、雜質或大量細胞碎片?。
懸浮細胞比例?:若為貼壁細胞,應有少量懸浮細胞(微量);若為懸浮細胞,應均勻分散?。
4. 細胞活性檢測
貼壁分子?:活細胞表面存在功能性黏附分子(如糖蛋白),死細胞則失活或降解?。
注意事項
低吸附培養板特性?:專為懸浮細胞設計,若細胞貼壁,需檢查培養板是否適用或處理是否失效?。
避免誤判?:細胞膜邊緣清晰度非金標準,應以膜完整性為準?。
若需進一步確認,可結合臺盼藍染色和顯微鏡觀察,確保細胞活性與培養板適用性匹配。
注:供科研使用,以上資料供參考。
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