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天津本生-如何科學(xué)正確地使用凍存管呢?
凍存管的使用是一門學(xué)問，并不是打開液氮罐、放入凍存管、關(guān)上液氮罐這樣簡(jiǎn)單的三部曲可以完成的。科學(xué)正確地使用凍存管，可以避免樣本的損失，并保護(hù)試驗(yàn)人員的安全。下面便是天津本生小編的詳解，不放來看看。
凍存管：冷凍步驟
用預(yù)熱的PBS溶液洗滌細(xì)胞，吸取溶液，含有胰蛋白酶和EDTA的溶液覆蓋細(xì)胞(薄薄的液層足夠，胰蛋白酶和EDTA的濃度需要根據(jù)細(xì)胞系確定)。
37℃孵育細(xì)胞3-5分鐘。
細(xì)胞從底部脫離之后，終止孵育，加入含有血清的培養(yǎng)基，用移液器輕輕地懸浮細(xì)胞。
離心細(xì)胞懸液(500 x g, 5分鐘)，用含有血清的培養(yǎng)基重新懸浮。
細(xì)胞計(jì)數(shù)。
離心細(xì)胞懸液(500 x g, 5分鐘)，去除上清液，用適量體積的含有血清的培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
以1:1體積比混合細(xì)胞和凍存液(60%培養(yǎng)基，20%胎牛血清，20% DMSO)，然后轉(zhuǎn)移到Cryo.sTM凍存管中。凍存的細(xì)胞密度為 1-5×106 個(gè)/毫升。
含有細(xì)胞的Cryo.sTM凍存管建議以?1 K / min 的速率降溫，可以將凍存管置于?70℃含有異丙醇的容器中。如果Cryo.sTM凍存管存儲(chǔ)其他樣品，可以直接放置在?20℃，?70℃或者液氮的氣相。為了確保樣品冷凍均勻，4 mL和5 mL的Cryo.sTM凍存管需要先置于在?20℃冰箱過夜，然后再轉(zhuǎn)移到?70℃或者液氮的氣相。
然后轉(zhuǎn)移Cryo.sTM凍存管到液氮罐。為了避免污染(如支原體)和安全考慮，請(qǐng)將Cryo.sTM凍存管置于液氮的氣相，切勿置于液相。
如何科學(xué)正確地使用凍存管?我司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成，于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品，為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)模化生產(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來。
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